Servicios científicos
Citometría de flujo
Responsable del servicio

Berta Raposo
Coordinador científico

María Luisa Toribio
Contacto
91 196 44 99
citometria (at) cbm.csic.es
Sistema de reservas
Reactivos
Tarifas
En el servicio de Citometría de flujo del CBM, nuestro personal proporciona apoyo científico-técnico en citometría de flujo, desarrolla y optimiza nuevas aplicaciones y realiza separaciones celulares.
La citometría de flujo es una herramienta analítica que permite discriminar partículas de diferente tamaño y color. Es una técnica analítica y/o preparativa basada en el análisis simultáneo de varios parámetros de naturaleza óptica, de forma rápida y sobre un gran número de partículas individualizadas. Este análisis se realiza sobre cada partícula a partir de la dispersión de la luz y de la emisión de fluorescencia de las partículas iluminadas por una fuente luminosa.
Los parámetros que pueden analizarse mediante citometría de flujo son: i) los relacionados con las características físicas de la partícula: tamaño y complejidad y ii) las diferentes fluorescencias asociadas a la partícula.
El análisis se realiza a tasas de miles de células/segundo, lo que permite obtener datos de gran fiabilidad estadística, así como identificar poblaciones representadas a baja frecuencia dentro de la población global.
Otra característica importante de la citometría de flujo es que el análisis se realiza en una suspensión de partículas, por lo que las partículas o células analizadas deben estar en suspensión y en forma de partícula única (célula).
Por último, es importante señalar que existe una restricción en cuanto al tamaño de las partículas analizadas, que debe estar comprendido entre 0,5 y 100um.
Vacío
Citometría convencional
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FACSCalibur (Becton Dickinson)
Dotado de dos líneas láser: azul (488nm) y roja (633nm) Software: Cell Quest-Pro |
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FACSCanto A (Becton Dickinson)
Dotado de dos líneas láser: azul (488nm) y roja (633nm) con 6 detectores de fluorescencia independientes:
Software: DiVA 8.0.1 |
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FACSCanto II HTS (Becton Dickinson)
Equipado con un sistema High Throughput Sampler Option (HTS) para la adquisición de muestras directamente desde placa multipocillo. 4 detectores para el láser de 488nm (azul): 530/30, 585/42, 695/40, 780/60 Software: DiVA 8.0.1 |
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FACSCanto II High (solo tubos) (Becton Dickinson)
Equipado con un sistema High Throughput Sampler Option (HTS) para la adquisición de muestras directamente desde placa multipocillo.
Software: DiVA 8.0.1 |
Citometría espectral
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AURORA 4L (Cytek) Configuración óptica: 4L (16V-14B-10YG-8R) 4 líneas láser y 48 detectores: 16 detectores para el láser violeta (405nm), 14 detectores para el azul (488nm), 10 detectores para el verde amarillo (561nm) y 8 detectores para el rojo (633nm). Características técnicas: Este equipo utiliza tecnología de espectro completo proporcionando una gran flexibilidad a los usuarios, permitiéndoles el uso de una amplia gama de fluorocromos combinándolos mucho más fácilmente que con otras tecnologías. Además, mejora la resolución de las poblaciones especialmente en muestras con alta autofluorescencia y/o bajos niveles de expresión de marcadores. |
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AURORA 5L ESP (Cytek) Configuración óptica: 5L (16UV-16V-14B-10YG-8R) 4 líneas láser y 64 detectores: 16 detectores para el láser ultravioleta (355nm),16 detectores para el láser violeta (405nm), 14 detectores para el azul (488nm), 10 detectores para el verde amarillo (561nm) y 8 detectores para el rojo (633nm). Características técnicas: Este equipo utiliza tecnología de espectro completo proporcionando una gran flexibilidad a los usuarios, permitiéndoles el uso de una amplia gama de fluorocromos combinándolos mucho más fácilmente que con otras tecnologías. Además, mejora la resolución de las poblaciones especialmente en muestras con alta autofluorescencia y/o bajos niveles de expresión de marcadores. Este equipo está dotado además con un módulo de alta sensibilidad en el detector de SSC que permite resolver partículas de menor tamaño que otros equipos logrando separarlas más fácilmente del ruido electrónico. (ESP, Enhanced Small Particle Detector) |
Cell sorters
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FACSAria Fusion (Becton Dickinson) Equipada con cuatro láseres de excitación de 405, 488, 561 y 640 nm. Dieciocho detectores (16 de fluorescencia + 2 de dispersión) de los cuales: 5 son para el láser de 405 nm (450/40, 525/50, 610/20, 660/20, 710/50, 780/60) 2 para el láser de 488 nm: 530/30, 695/20 4 para el láser de 561 nm: 610/20, 670/14, 710/50, 780/60 3 para el láser de 640 nm: 670/30, 730/45, 780/60. También está equipado con un sistema de control de temperatura y agitación de muestras. |
Estaciones de análisis y software
El servicio pone a disposición de los usuarios tres estaciones de análisis (Hewlett-Packard) equipadas con los siguientes programas para analizar datos de citometría e imagenes:
– Estación 1: FlowJo v10 y 7.6.5, Spectroflo3.3.1 (configuración de 4 o 5 L)
– Estación 2: FlowJo v10, Spectroflo 3.3. 1 (configuración de 4 L)
– Estación 3: FlowJo v10, Spectroflo 3.3.1 (configuración de 5 L), Gen5 y DIVA 9.
Además, el servicio pone a disposición de los usuarios una licencia del software on line OMIQ (una moderna plataforma de análisis de citometría de flujo basada en el uso de algoritmos matemáticos automatizados a la vez que permiten análisis clásico de gating manual.
Otros equipos
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Cytation (Agilent) Este microscopio está equipado con un objetivo 4X, y 3 líneas de fluorescencia: El Software de adquisición Gen5 simplifica la captura de imágenes y la lectura de placas. |
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eFlux Analyzer XF96 (Agilent) El Analizador de Flujo Extracelular XF96 (Agilent-Seahorse) permite la caracterización del metabolismo energético de células en cultivo de forma no invasiva. El instrumento analiza el consumo de oxígeno (OCR) y la acidificación extracelular (ECAR, una medida indirecta de la producción de lactato) en placas de 96 pocillos. Nuestro servicio proporciona acceso al equipo, así como asistencia básica tanto en el diseño de experimentos como en el análisis de datos. |
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NanoSight NS300 (Malvern Panalytical) Aplicaciones: |
Personal

Berta Raposo Ponce
Lab.: 111 Ext.: 4499
braposo(at)cbm.csic.es

Raquel Nieto Pintado
Lab.: 111 Ext.: 4698/4705
rnieto(at)cbm.csic.es

Silvia Andrade Calvo
Lab.: 111 Ext.: 4698/4705
sandrade(at)cbm.csic.es

Matilde Riquelme Sánchez
Lab.: 111 Ext.: 4698/4705
mriquelme(at)cbm.csic.es